抗体芯片的技术路线

本panel可检测以下因子：4-1BB/TNFRSF9/CD137,alpha 2-Macroglobulin,ADAMTS13,Adiponectin/Acrp30,Aggrecan,AgRP/ART,Aldehyde Dehydrogenase 1-A1/ALDH1A1,alpha 1-Microglobulin,Angiogenin,Angiopoietin-1,Angiopoietin-2,Angiopoietin-like Protein 3/ANGPTL3,Angiopoietin-like Protein 6/ANGPTL6,B7-H3,BMP-2,BMP-9,Carbonic Anhydrase IX/CA9,CCL8/MCP-2,CCL11/Eotaxin,CCL13/MCP-4,CCL20/MIP-3 alpha,CCL23/MPIF-1,CCL25/TECK,CCL27/CTACK,CD14,CD117/c-kit,Coagulation Factor III/Tissue Factor,Complement C9,Contactin-1,CXCL11/I-TAC,CXCL13/BLC/BCA-1,Dkk-1,EGF,Endoglin/CD105,EpCAM/TROP1,Fas Ligand/TNFSF6,Fetuin A/AHSG,Fibroblast Activation Protein alpha/FAP,Flt-3 Ligand/FLT3L,Galectin-3,GDF-15,GDNF,GITR/TNFRSF18,IFN-beta,IGFBP-6,IL-23,IL-31,Pro-Collagen I alpha 1,Serpin E1/PAI-1 种属：HumanLabEx现有MSD、Luminex、CBA，抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。抗体芯片的技术路线

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。attune nxt 流式本panel可检测以下因子：IFN-γ,IL-1β,IL-4,IL-5,IL-6,IL-10,IL-13,KC/GRO,TNF-α 种属：Rat。

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。

本panel可检测以下因子：CCL8/MCP-2,Complement Factor D/Adipsin,CXCL1/GRO alpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRO beta/MIP-2/CINC-3,EGFR,EMMPRIN/CD147,G-CSF,Granzyme B,Haptoglobin,HGF,IFN-gamma,IGFBP-3,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-12 p70,IL-16,IL-17E/IL-25,IL-6R alpha,LDLR,MMP-8,MMP-9,beta-NGF,Pancreatic Polypeptide/PP,PDGF-AA,Periostin/OSF-2,Podocalyxin,Prolactin,Renin,S100A9,P-Selectin/CD62P,Syndecan-1/CD138,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TWEAK/TNFSF12 种属：Mouse本panel可检测以下因子：6CKine/CCL21,BCA-1/BLC,MCP-5/CCL12,RANTES,SDF-1α,TARC 种属：Mouse。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。本panel可检测以下因子：MCP-1,NGAL/LCN2,TIMP-1,TSP-1 种属：Rat。结核抗体芯片检测阳性

本panel可检测因子：IL-9,IL-15,IL-17A/F,IL-27p28/IL-30,IL-33,IP-10,MCP-1,MIP-1α,MIP-2 种属：Mouse。抗体芯片的技术路线

炎症相关的生物标志物包括:（1）肠道微生物因子：肠道菌群可能受到饮食，益生菌，益生元，外源酶，粪便菌群移植和其他环境因素的影响（2）免疫相关：肠道菌群驱动炎症的扩大，细胞浸润固有层，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子，包括TNF，IL-1β，IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。（3）炎症介质：如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子（如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β）等。抗体芯片的技术路线

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